Из-за сходства клинических проявлений воспалительных процессов в мочеполовой системе различной этиологии, а также частоты смешанных инфекций той же локализации в первую очередь необходимо исключить гонорею, трихомоноз, микоплазмоз. Лабораторные исследования являются важнейшим компонентом комплексного обследования больных. С их помощью устанавливают этиологический диагноз, определяют тактику лечения и оценивают эффективность этиотропной терапии, осуществляют эпидемиологический надзор.
В настоящее время для лабораторной диагностики мочеполового хламидиоза осуществляют индикацию (определение) хламидий непосредственно в пораженных клетках, выделение возбудителя и обнаружение хламидийных антител.
Индикация хламидий непосредственно в пораженных клетках. Этот метод предусматривает выявление цитоплаз-матических включений, образуемых хламидиями, при окрашивании морфологических структур микроорганизма. Материалом служат соскобы с доступных слизистых оболочек мочеполовых (мочеиспускательный канал, шейка матки, канал шейки матки и др.) и других органов (конъюнктива, прямая кишка и др.) при экстрагенитальных формах хламидийной инфекции. Реже исследуют мазки — отпечатки выделений, секретов и тканей, биопсированных при хирургических вмешательствах.
Определение морфологических структур микроорганизмов. Обнаружение цитоплазматических включений хламидий в эпителиальных клетках препаратов, окрашенных по методу Романовского—Гимзы, является классическим методом диагностики хламидиозов.
Цитоплазматические включения представляют собой компактные или рыхло расположенные зернистые массы, содержащие морфологические структуры возбудителя на разных этапах его размножения. Они часто определяются вблизи ядра, нередко смещая его к периферии клетки, имеют разнообразную форму, отличаясь по цвету и внутренней структуре от ядра и цитоплазмы. Мелкие ранние включения, содержащие большие тельца диаметром 0,5—1,2 мкм, имеют сине-фиолетовую окраску, крупные включения с преимущественно мелкими зрелыми структурами возбудителя — розовокрасную. Нередко в одной клетке вьивляются включения хламидий разной зрелости и различной плотности расположения. При рыхлом расположении морфологических структур микроорганизма обнаруживается содержащая их вакуоль.
Во избежание диагностических ошибок цитоплазматические включения следует четко дифференцировать с другими структурными образованиями, которые могут встречаться в исследуемых препаратах. Это пигментные гранулы черного или темно-зеленого цвета, иногда в цитоплазме у ядра — в виде зернистых масс: зернистые структуры травмированного ядра, сходные по цвету, форме и размерам с ядерным материалом неповрежденных клеток; зерна муцина, окрашивающиеся в красный или синий цвет, располагающиеся в цитоплазме отдельно друг от друга; эозинофильные зерна разрушенных эозинофилов, располагающиеся поодиночно или на поверхности эпителиальных клеток; диффузная эозинофильная многомерная зернистость цитоплазмы; клеточный детрит, адсорбированный на поверхности или фагоцитированный эпителиальной клеткой; сопутствующая микрофлора, включающая часто гонококки, стрептококки, пневмококки, дифтероиды и другие микроорганизмы, которые обычно выявляются не только на поверхности эпителиальных клеток, но и на других участках препарата.
Обнаружение цитоплазматических включений в препаратах из соскобов позволяет диагностировать в целом около 10—15 % случаев хламидийной инфекции, протекающей как манифестно, так и бессимптомно.
Выделение хламидий в куриных эмбрионах. Выделение хламидий в 6— 8-дневных развивающихся куриных эмбрионах, зараженных в желточном мешке, долгое время было единственным методом надежной этиологической диагностики хламидийных инфекций и до сих пор остается высокоспецифическим методом диагностики урогенитальной хламидийной инфекции, ее экстрагенитальных проявлений, а также пахового лимфогранулематоза.
Критерии диагностического выделения хламидий — наличие морфологических структур микроорганизма и содержание родоспецифического антигена. Специфическая летальность эмбрионов обычно проявляется в последующих пассажах.
Выделение хламидий в культурах клеток. Большинство представителей вида Ch. trachomatis, за исключением возбудителя пахового лимфогранулематоза, не способны в стандарных условиях метода инфицировать клетки и размножаться в различных их культурах. Данное обстоятельство долго ограничивало использование метода культур клеток для диагностики урогенитальных хламидиозов и хламидиозов другой локализации. Избежать этого помогли дополнительные методические приемы, способствующие повышению адсорбции микроорганизма на поверхности клеток, активации его поглощения клеткой и подавлению ее нормального метаболизма. С этой целью широко применяют как самостоятельно, так и в различных комбинациях центрифугирование инфекционного материала на монослой клеток, облучение клеток рентгеновскими лучами, обработку монослоя клеток ДЭАЭ-декстраном — олигосахаридом, активирующим поглощение макромолекул, обработку клеток 5-йод-2-дезоксиуридином или циклогексимидом — антиметаболитами, обладающими цитостатическим действием.
