Перед взятием материала для лабораторного исследования с целью обнаружения палочки мягкого шанкра поверхность язвы очищают от загрязнения изотоническим раствором натрия хлорида. Затем пинцетом или острой ложечкой отбирается некротизированная ткань с края язвы в качестве материала для исследования. Соскоб размазывается по обезжиренному чистому предметному стеклу. Окраску наиболее целесообразно производить по Романовскому—Гимзе. Возбудитель мягкого шанкра располагается в виде цепочек по 20—30 коротких палочек. Они граммотрицательные, размещаются обычно внеклеточно, но на более поздних стадиях — и внутриклеточно. Возбудитель мягкого шанкра обнаруживают также в гное вскрывшегося и невскрывшегося (в пунктате) лимфатического узла.

В сомнительных и затруднительных случаях прибегают к культурально-му исследованию. Возбудитель выделяют, применяя специальные методы, в частности при посеве отделяемого из очагов поражения на «шоколадный» агар с 1 % раствором изовиталекса и 3 мгк/мл ванкомицина.

Поскольку возбудитель мягкого шанкра не вызывает иммунитета, из диагностических соображений может быть проведена аутоинокуляционная проба. Материал, взятый из язвы, вносится в царапину на животе или бедре самого пациента. Сверху пластырем наклеивается часовое стеклышко, позволяющее наблюдать за ходом развития пробы. В течение 1—3 сут развивается типичный мягкий шанкр, в котором могут быть обнаружены его возбудители. Аутоинокуляционная проба в настоящее время не имеет существенного значения, так как ожидание результата при постоянно нарастающей клинической картине заболевания в области половых органов вряд ли оправданно. При обоснованном подозрении на мягкий шанкр начинают лечение антибиотиками, которые, естественно, делают аутоинокуляцию невозможной.

Внутрикожный тест с использованием суспензии инактивированных бактерий (кожный тест Дюкрея), рекомендовавшийся для диагностики мягкого шанкра, в повседневной практике считается малонадежным и применяется редко.

В дифференциальной диагностике мягкий шанкр следует отличать от твердого шанкра, простого герпеса, эрозивного и гангренозного баланопостита или вульвита, острой язвы Липшютца, дифтерии половых органов, туберкулезных язв.

Особенно затруднена диагностика в случаях одновременного заражения мягким шанкром и сифилисом. У больных смешанным (мягким и твердым) шанкром значительно реже удается выявить палочку мягкого шанкра, в соскобе из-под края язвы наблюдается картина мягкого шанкра, через 3—4 нед. появляются уплотнение дна язвы и регионарный склераденит. Для ранней диагностики смешанного шанкра обязательно исследование на бледную тре-понему отделяемого язв, пунктата лимфатических узлов и серологические исследования крови. Следует иметь в виду, что мягкий шанкр задерживает развитие сифилитической инфекции, продлевает инкубационный период и отдаляет пояачение вторичных сифилидов.